【摘 要】
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目的 建立一种高灵敏度的高效液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）,分析绝经后妇女血清中包含雌酮（E1）、雌二醇（E2）及其羟基化、甲基化、葡萄糖醛酸结合/硫酸结合（-G/S）等代谢产物的水平。方法 采用叔丁基甲醚液-液萃取法，结合β-葡萄糖醛酸苷酶/芳基硫酸酯酶水解及丹磺酰氯对萃取后的血清样品进行衍生化处理。以同位素标记的雌酮-d4作为内标，采用Waters UPLCⅠ-Class/Xevo
【基金项目】
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江苏省自然科学基金青年基金（BK20190122）； 江苏省研究型医院学会精益化用药科研基金（JY202109）； 南京药学会—常州四药医院药学科研基金（2021YX001）；
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目的 建立一种高灵敏度的高效液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）,分析绝经后妇女血清中包含雌酮（E1）、雌二醇（E2）及其羟基化、甲基化、葡萄糖醛酸结合/硫酸结合（-G/S）等代谢产物的水平。方法 采用叔丁基甲醚液-液萃取法，结合β-葡萄糖醛酸苷酶/芳基硫酸酯酶水解及丹磺酰氯对萃取后的血清样品进行衍生化处理。以同位素标记的雌酮-d4作为内标，采用Waters UPLCⅠ-Class/Xevo TQS液质联用系统测定。以ACQUITY UPLC BEH C18 （2.1 mm×100 mm, 1.7μm）为色谱柱，水/甲醇（含0.05%甲酸和2 mmol/L甲酸铵）为流动相，0.3 mL/min流速梯度洗脱。柱温为50℃,进样量10μL。电喷雾离子源（ESI）正离子模式下扫描，多重反应监测（MRM）下测定，分析时间7 min。结果 各类雌激素定量下限低至1～2 pg/mL,平均加标回收率在90.3%～111.3%之间。绝经后妇女血清各类雌激素总量远高于临床常规雌激素指标E2的水平，并以E1-G/S和16α-羟基雌酮结合型（16OHE1-G/S）水平相对较高。各类雌激素-G/S结合型水平均不低于其游离型水平。2-羟化和16-羟化通路为优势代谢通路。结论 该方法灵敏度高、分析时间短、特异性强，可用于临床绝经后妇女血清样本中微量雌激素及代谢物的定量分析。
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