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大肠杆菌是制药工业中的重要蛋白质药物生产菌株,然而乙酸积累、中心碳代谢负担过重等不良因素严重制约着大肠杆菌的高密度生长。本文利用Red同源重组技术,构建icd和ptsG双基因敲除大肠杆菌菌株,以分流碳代谢流,提高碳利用效率,最终增加菌体生物量。同时构建ppc过表达质粒,减少乙酸积累。发酵结果显示,构建的重组菌株产酸量大幅减少,pH值平均升高20%,菌体浓度增加了50%,生长特性得到了强化。