超高效液相色谱-荧光法检测精液中DNA甲基化水平

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目的建立超高效液相色谱-荧光法(UPLC-FLD)定量分析精液标本中DNA甲基化水平。方法精液样本DNA提取、水解后,以100 mmol/L 2-溴苯乙酮为衍生试剂,在0.51 mol/L乙酸乙腈溶液中80℃加热60 min,生成脱氧胞嘧啶核苷(d C)和5-甲基脱氧胞嘧啶核苷(5md C)的荧光衍生物(λex=306 nm,λem=378 nm)。取1μL上清液进样,经Agilent C18色谱柱(2.1×100 mm、1.8μm)分离[流动相为28%甲醇+10%乙腈+62%水溶液(含0.1%
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