探讨细胞沉默调节蛋白1(SIRT1)在不同剂量染氟致脑损伤大鼠脑组织中的表达。
方法清洁级SD大鼠48只,按体质量(90~ 100 g)采用随机数字表法分为4组:对照组(正常饲料,含氟量为4.5 mg/kg)、低氟组(饲料含氟量为25.0 mg/kg)、中氟组(饲料含氟量为50.0 mg/kg)和高氟组(饲料含氟量为100.0 mg/kg),每组12只,雌雄各半。各组大鼠自由饮用自来水,低、中、高氟组自由食用课题设计不同配方的原煤加拌泥煤烘烤的玉米饲料,饲料中其他成分与对照组饲料相同,于染氟90 d处死大鼠。在处死大鼠前7 d,采用Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力;处死大鼠后立即取脑组织和大腿长骨。尿氟和骨氟测定采用氟离子选择电极法,脑组织SIRT1 mRNA和蛋白表达检测采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blot)。
结果在空间探索实验中,对照组和低、中、高氟组首次穿越平台时间[(9.8 ± 3.5)、(15.8 ± 5.1)、(22.2 ± 7.9)、(30.5 ± 8.5)s]组间比较差异有统计学意义(F= 10.853,P < 0.05);对照组和低、中、高氟组大鼠穿越平台次数[(5.2 ± 2.1)、(3.3 ± 1.6)、(1.3 ± 1.1)、(1.2 ± 0.8)次/60 s]组间比较差异有统计学意义(F= 10.105,P < 0.05);对照组和低、中、高氟组大鼠原平台象限停留时间[(30.5 ± 9.8)、(22.7 ± 4.6)、(13.8 ± 4.8)、(7.0 ± 2.4)s]组间比较差异有统计学意义(F= 17.433,P < 0.05),其中中、高氟组明显低于对照组(P均< 0.05);随染氟剂量增加,首次穿越平台时间逐渐延长,穿越平台次数和原平台象限停留时间逐渐降低,中、高氟组与低氟组比较差异均有统计学意义(P均< 0.05)。对照组和低、中、高氟组SIRT1 mRNA表达(0.979 ± 0.088、0.907 ± 0.050、0.426 ± 0.073、0.219 ± 0.092)组间比较差异有统计学意义(F= 136.837,P < 0.05);对照组和低、中、高氟组SIRT1蛋白表达(1.224 ± 0.139、0.988 ± 0.096、0.581 ± 0.084、0.269 ± 0.066)组间比较差异有统计学意义(F= 107.961,P < 0.05);随染氟剂量的增加,SIRT1 mRNA和蛋白表达水平均逐渐降低,中、高氟组与低氟组比较差异均有统计学意义(P均< 0.05)。
结论氟中毒可影响大鼠学习记忆能力,大鼠脑组织中SIRT1 mRNA和蛋白表达水平降低,随染氟剂量的增加,变化更为明显。