流式细胞术快速测定红细胞渗透脆性的应用

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目的建立流式细胞术快速检测红细胞渗透脆性的方法,评估流式细胞仪测定红细胞渗透脆性的可能性。方法收集30例抗凝外周血,每例标本均一分为二,1份在采集2 h内检测(正常对照组),另1份经37℃孵育24 h(阳性对照组);另收集3例临床确诊的遗传性球形红细胞增多症患者作为疾病组。分别使用流式细胞术检测各组红细胞渗透脆性。通过流式细胞术测定红细胞残留百分比确定生理盐水和无菌水最佳体积比,确定乙二胺四乙酸(EDTA)和肝素2种抗凝剂对其的影响。另收集14例肝素抗凝标本,同时采用改良Sanford法和流式细胞术测定红细胞残留百分比,对比评价流式细胞术和改良Sanford法测定红细胞渗透脆性的特点。结果采用流式细胞术检测正常对照组的红细胞残留百分比为72.03%±5.68%,明显高于阳性对照组(46.47%±15.83%,P<0.05);疾病组红细胞残留百分比为5.76%±3.54%,明显低于正常对照组(P<0.001)。当生理盐水和无菌水体积比为1.2∶0.8时,正常对照组和阳性对照组红细胞残留百分比差异最大(P<0.05);与EDTA抗凝剂比较,肝素抗凝的外周血更适合于红细胞渗透脆性检测。流式细胞术与改良Sanford法测定红细胞渗透脆性有较好的一致性,但流式细胞术敏感性更高。结论流式细胞术测定红细胞渗透脆性具有操作简便、敏感性更好等特点,有实际应用的可行性。
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