【摘 要】
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目的:对枯草杆菌ylmK基因进行3'端荧光标记以便对其产物YlmK蛋白在菌体中的位置进行初步观察.方法:以BS168菌株基因组DNA为模板,PCR扩增ylmK基因的3'端序列,并将其克隆到载体
【机 构】
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山西农业大学食品科学与工程学院,School of Biological and Chemical Sciences Callaghan
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目的:对枯草杆菌ylmK基因进行3'端荧光标记以便对其产物YlmK蛋白在菌体中的位置进行初步观察.方法:以BS168菌株基因组DNA为模板,PCR扩增ylmK基因的3'端序列,并将其克隆到载体pSG1164中,形成ylmK'-gfpmut1融合,构建重组载体pNG424;将pNG424转化枯草杆菌168菌株,单交换形成完整的功能性3'端gfpmut1标记的ylmK基因,菌落PCR对阳性转化子BS362进行鉴定,用表面荧光显微镜技术对BS362进行观察.结果:荧光检测结果表明GFP标记的YlmK分布于菌体的外周,在位置上靠近细胞膜并与之平行排列.结论:YlmK是一种膜蛋白.
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