【摘 要】
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目的研究血管抑制药物贝伐单抗与自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)联用对于肺癌A549细胞增殖的抑制作用。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)法分别描绘贝伐单抗与3-MA作用于肺癌A549细胞
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目的研究血管抑制药物贝伐单抗与自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)联用对于肺癌A549细胞增殖的抑制作用。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)法分别描绘贝伐单抗与3-MA作用于肺癌A549细胞时的细胞生长曲线,并计算贝伐单抗对A549细胞的半数抑制浓度(Ic50)及3-MA对于A549细胞的抑制浓度Ic10;AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞术检测A549细胞凋亡率;吖啶橙(AO)与单丹磺酰尸胺(MDC)染色对照组、贝伐单抗组、3-MA组及联合用药组细胞后,在荧光显微镜下观察细胞自噬与凋亡状态;蛋白免疫印迹杂交(Western印迹)检测微管相关蛋白(LC)-3的表达变化〔1〕。结果流式细胞仪测得贝伐单抗组、3-MA组及联合用药组细胞凋亡率分别为(21.82±0.41)%、(3.54±0.11)%、(37.36±0.87)%;贝伐单抗组细胞分别经MDC及3-MA染色后,细胞中出现大量自噬空泡,而在加入3-MA联合作用后,自噬空泡现象被不同程度抑制;Western印迹结果显示LC-3在贝伐单抗组中的表达较对照组明显增加,在单用3-MA组中,二者表达明显减少,在联合用药组中的表达均介于贝伐单抗组及3-MA组之间。结论贝伐单抗可诱导肺癌A549细胞凋亡,同时增强细胞自噬;当与3-MA联用时,贝伐单抗的促细胞凋亡作用增加。
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