【摘 要】
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从1株快速水解乳糖发酵产酸的凝结芽孢杆菌NL01的基因组上克隆获得了1个新的β-半乳糖苷酶基因,该基因长度为1 998 bp,其编码的氨基酸序列与已经报道的β-半乳糖苷酶相似度低
【机 构】
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南京林业大学化学工程学院江苏省生物质绿色燃料与化学品重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金青年基金项目(31300487,31200443);江苏省自然科学基金青年项目(BK20130970);江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)
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从1株快速水解乳糖发酵产酸的凝结芽孢杆菌NL01的基因组上克隆获得了1个新的β-半乳糖苷酶基因,该基因长度为1 998 bp,其编码的氨基酸序列与已经报道的β-半乳糖苷酶相似度低于40%。将该β-半乳糖苷酶基因整合到表达载体pETDuet-1上,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行重组表达,β-半乳糖苷酶粗酶酶活为1190μmol/(min·mg),经镍柱纯化获得的重组β-半乳糖苷酶酶活为6664μmol/(min·mg)。利用该重组β-半乳糖苷酶水解乳糖,经TLC和HPLC分析显示该酶具有将乳糖水解为葡萄糖和半乳糖的活力,是一种新型的β-半乳糖苷酶。
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