以TMB作供氢体测定微量HRP的新方法及其应用

来源 :军事医学科学院院刊 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dada_2003
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辣根过氧化物酶(HRP)是目前广为流行的一个标记酶。HRP成色反应方程为: HRP+H_2O_2←→[HRP.H_2O_2] (1) [HRP.H_2O_2]+(CHR)H_2←→(CHR)+ HRP+H_2O (2) 其中(CHR)H_2为供氢体,(CHR)为其氧化变色产物。测定HRP活力的方法有愈疮木酚法,联大茴香胺法,2、3′、6—三氯碘酚及二氨基联苯胺等方法。有些测定范围达1—25ng(30u/mgHRP)。但对于测定更微量的HRP,如欲分析某一很小神经组织内HRP的摄取和转运及在一定条件下的变化,以上这些方法的灵敏度尚嫌不足。因此需要摸索一种灵敏度更高的测定方法。据报道,目前HRP组化呈色反应常用的 Horseradish peroxidase (HRP) is a widely used marker enzyme. HRP color reaction equation is: HRP + H 2 O 2 ← → [HRP.H 2 O 2] (1) [HRP.H 2 O 2] + (CHR) H 2 ← → (CHR) + HRP + H 2 O (2) , (CHR) for its oxidative color products. Methods for determining HRP activity include the guaiacol method, the dianisidine method, 2,3 ’, 6-trichloroiodol and diaminobenzidine and the like. Some assays range from 1 to 25 ng (30 u / mg HRP). However, for the determination of trace amounts of HRP, to analyze a very small nerve tissue HRP uptake and transport and under certain conditions, the sensitivity of these methods is still not enough. Therefore, we need to explore a more sensitive method of determination. It is reported that currently HRP histone reaction commonly used
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