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目的:克隆人肾细胞癌特异性抗原G250基因,使其能够在真核细胞中表达并锚定修饰于细胞膜上。方法:提取人肾透明细胞癌细胞的总RNA,用RT—PCR扩增出G250基因,插入含有人IgK链前导信号肽、IgG—Fc和GPI锚定信号肽基因序列的真核表达载体pCI—neo—GPI中;将构建的重组质粒pCI—neo—GPI—G250转染RenCa细胞,利用RT-PCR、Western印迹和免疫荧光检测G250在细胞中的表达。结果:构建的重组质粒pCI—neo—GPI-G250经测序正确;用各种方法对筛选得到的稳定转染细