【摘 要】
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微管相关蛋白tau的异常过度磷酸化是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的重要发病机制之一,蛋白磷酸酯酶2A(protein phosphatases 2A,PP2A)能够促进tau蛋白的去磷酸化。
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81703729,81473373);北京市自然科学基金资助项目(7164315);北京市教委新医药学科群项目(XK100270569);北京市高层次卫生技术人才计划(2014-2-014)
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微管相关蛋白tau的异常过度磷酸化是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的重要发病机制之一,蛋白磷酸酯酶2A(protein phosphatases 2A,PP2A)能够促进tau蛋白的去磷酸化。山茱萸环烯醚萜苷(CIG)是本室从山茱萸中提取的主要有效部位。本实验的目的是研究CIG对PP2A活性及其相关调节酶的影响,应用PP2A抑制剂冈田酸(okadaic acid,OA)与人神经母细胞瘤细胞株(SK-N-SH细胞)孵育制备拟AD细胞模型;采用PP2A试剂盒测定细胞内PP2A的活性;应用Western blot方法检测tau蛋白磷酸化、PP2A催化亚基C(PP2Ac)和Src的表达。结果显示:OA与SK-N-SH细胞孵育6 h后,显著增高tau蛋白的磷酸化水平,降低PP2A活性,增高PP2Ac和Src的磷酸化水平。CIG与细胞预孵育24 h能够明显抑制OA模型细胞tau蛋白在Ser 199/Ser 202位点和Ser 396位点的过度磷酸化,恢复PP2A活性,抑制PP2Ac在Tyr 307位点的过度磷酸化和Src在Tyr 416位点的过度磷酸化。提示CIG通过抑制Src在Tyr 416位点的磷酸化降低其活性而抑制PP2Ac的磷酸化,从而恢复PP2A活性,促进tau蛋白的去磷酸化,最终抑制tau蛋白异常过度磷酸化。结果说明CIG可能有利于治疗AD。
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