【摘 要】
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目的：观察杜氏盐藻寡糖基转移酶亚基stt3a的酵母双杂交诱饵载体表达产物对酵母细胞有无毒害作用并检测其自激活作用。方法：应用PCR方法获得stt3a可溶端的基因片段,将基因片段按
【机 构】
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郑州大学生物工程系细胞生物学研究室,河南中医学院生理教研室
【基金项目】
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科技部国际科技合作基金资助项目2007DFA01240, 国家自然科学基金资助项目30700014
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目的：观察杜氏盐藻寡糖基转移酶亚基stt3a的酵母双杂交诱饵载体表达产物对酵母细胞有无毒害作用并检测其自激活作用。方法：应用PCR方法获得stt3a可溶端的基因片段,将基因片段按正确的方向插入到酵母表达质粒pGBKT7中,经限制性内酶切鉴定正确后,用PEG/LiAc法转化到酵母菌株Y187中,并通过表型筛选检测诱饵蛋白有无毒性和自激活作用。结果：成功获得了stt3a可溶端的基因片段,其表达的蛋白对酵母菌株Y187无毒害,报告基因-半乳糖苷酶活性没有被诱导。结论：酵母双杂交GAL4系统可以被用来研究杜氏盐藻
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