t-PA突变体山羊乳腺表达载体构建及转染细胞的核移植试验

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【摘要】

：

构建了t-PA突变体山羊乳腺特异表达载体pGBCt-PAm,包括长4.1 kb的山羊β-酪蛋白启动子以及启动子前2.4kb的鸡β-珠蛋白绝缘子序列;并检测了表达载体在家兔乳腺的瞬间表达,验

【作者】

：

杨正田兰国成沈伟吴晓洁徐秀英谭景和邓继先

【机构】

：

军事医学科学院,生物工程研究所,北京,100071山东农业大学,动物科技学院,泰安,271018;军事医学科学院,生物工程研究所,北京,100071;西北农林科技大学,动物科技学院,杨凌,712100

【出处】

：

生物技术通讯

【发表日期】

：

2004年5期

【关键词】

：

乳腺生物反应器 β-酪蛋白核移植胚胎移植转基因羊

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构建了t-PA突变体山羊乳腺特异表达载体pGBCt-PAm,包括长4.1 kb的山羊β-酪蛋白启动子以及启动子前2.4kb的鸡β-珠蛋白绝缘子序列;并检测了表达载体在家兔乳腺的瞬间表达,验证了载体的有效性.通过电击和脂质体2种转染方式转染了山羊胎儿成纤维细胞(GFFC),经过筛选检测,得到了7株能大量扩增的PCR阳性细胞株.其中的2株(M9,M10)已经进行了首次细胞核移植和胚胎移植试验,2只受体羊2个情期未见返情.

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