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糖多孢红霉菌eryG基因编码产物为红霉素3″-O-甲基转移酶（EryG），失活eryG基因能阻断红霉素A的生物合成，积累其中间产物红霉素C。以糖多孢红霉菌A226基因组DNA为模版，用重叠PCR方法扩增出eryG基因两侧约1600bpDNA片段（△G），其中去除了EryG上S-腺苷甲硫氨酸结合区域对应的290bpDNA片段。将该片段克隆于质粒pWHM3，构建了同源重组质粒pWHM△G。PEG介导原生质体转化法将pWHM△G转入糖多孢红霉菌A226中，通过染色体同源重组突变染色体上eryG基因。利用薄层层析