人NPTX2基因原核表达载体构建及重组蛋白的表达纯化

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目的在大肠埃希菌中表达人神经元正五聚蛋白2(NPTX2),并对该重组蛋白进行纯化、鉴定。方法双酶切pReceiver-M15 NVTX2质粒获得人NPTX2全长cDNA,经NotⅠ和EcoRⅠ双酶切后,连接至谷胱甘肽-S转移酶(GST)融合表达载体pGEX4T-1中,经限制性酶切、PCR和测序验证正确后,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导重组蛋白表达,采用Western blotting鉴定表达产物,亲和层析法纯化GST-NPTX2蛋白。结果经酶切与测序鉴定证实原核重组载体pGEX4T-1
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