烟草质体多顺反子定点整合表达载体的构建和转化

来源 :植物生理与分子生物学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：HGameG

【摘要】

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构建了烟草质体多顺反子定点整合表达载体pLM4(-psaA-Prrn-RBS-man-RBS-gfp-RBS-aadA-psbA3'-psbC-).用基因枪将该载体轰击烟草叶片5次,用添加了壮观霉素的选择分化培养

【作者】

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陆云华马立新陈俊蒋思婧

【机构】

：

湖北大学生命科学学院分子微生物与基因工程实验室,湖北大学生命科学学院分子微生物与基因工程实验室

【出处】

：

植物生理与分子生物学学报

【发表日期】

：

2005年6期

【关键词】

：

多顺反子表达载体的构建烟草叶绿体转化基因表达基因枪法 multicistron construction of expression vector

【基金项目】

：

国家科技攻关项目，科技部专项基金，湖北省自然科学基金

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构建了烟草质体多顺反子定点整合表达载体pLM4(-psaA-Prrn-RBS-man-RBS-gfp-RBS-aadA-psbA3'-psbC-).用基因枪将该载体轰击烟草叶片5次,用添加了壮观霉素的选择分化培养基筛选,获得质体转基因烟草6株.用PCR、激光扫描、Western blot和RFLP等方法检测都证实多顺反子表达盒中的3个基因甘露聚糖酶基因(man)、绿荧光蛋白基因(gfp)、氨基糖苷3'-腺苷酰基转移酶基因(aadA)已整合到烟草质体基因组中,且均得到表达.

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