【摘 要】
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目的 构建重组羧肽酶B（rCPB）的表达质粒和表达菌株，表达羧肽酶B（CPB），并对表达CPB包涵体的溶解性进行研究。方法构建CPB重组质粒pET-21a—CPB，将其导入表达菌株BL21（DE3）中，分别在25℃
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
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目的 构建重组羧肽酶B（rCPB）的表达质粒和表达菌株，表达羧肽酶B（CPB），并对表达CPB包涵体的溶解性进行研究。方法构建CPB重组质粒pET-21a—CPB，将其导入表达菌株BL21（DE3）中，分别在25℃和37℃进行诱导表达；所得包涵体分别用不同浓度尿素添加不同还原剂溶解，以溶液中的蛋白质浓度判定其溶解性，利用非还原SDS—PAGE分析其溶解性提高的原因。结果诱导后生长温度不同对rCPB包涵体的纯度及后期处理均有影响；rCPB包涵体在10mol／L尿素溶液中的溶解度比在8mol／L尿素溶液中提高
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