A群轮状病毒TaqMan RT-PCR检测方法的建立

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目的建立以特异性荧光探针为特点的Taqman荧光定量RT-PCR方法,对轮状病毒A群核酸进行检测。方法根据轮状病毒A群基因组保守序列设计引物和探针,建立并分析TaqMan RT-PCR的重复性、特异性、敏感性;以所建立的方法对128例病毒性腹泻患者粪便标本进行检测,同时以基因测序进行验证。结果所建立的TaqMan RT-PCR检测方法对轮状病毒A群具有很好的特异性和重复性,灵敏度达到101拷贝/μl。128例粪便标本中,轮状病毒A群的检出率为18.0%,与基因测序比对结果相符。结论构建的轮状病毒A群TaqMan RT-PCR检测方法快速、特异且灵敏,可用于临床病原诊断和流行病学调查。
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