【摘 要】
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以巴西橡胶树‘热研7-33-97’品种花药体胚胚性愈伤组织的新鲜增殖组织为培养材料,建立和优化适合橡胶树胚性愈伤组织增殖的悬浮培养体系,并对悬浮组织进行体细胞胚的成熟诱
【机 构】
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海南大学热带农林学院,海南省热带生物资源可持续利用重点实验室,海口,570228
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以巴西橡胶树‘热研7-33-97’品种花药体胚胚性愈伤组织的新鲜增殖组织为培养材料,建立和优化适合橡胶树胚性愈伤组织增殖的悬浮培养体系,并对悬浮组织进行体细胞胚的成熟诱导和植株再生.结果 表明:橡胶树体细胞胚诱导的易碎胚性愈伤组织是建立稳定、均一的悬浮细胞系非常适合的材料;改良MS+ 1.0 mg/L2,4-D+1.5 mg/L KT+0.5 mg/L NAA有利于细胞分裂,最适初始接种量为1.2 g/50 mL,旧培养液比例为1/3;悬浮培养物易分散、细胞大小均一、形态一致,细胞团由4～15个细胞聚合而成,细胞颜色淡黄色,培养基清澈透亮;胚性愈伤悬浮细胞的生长曲线呈S形,第3～第7天是指数增长期,最适继代周期为7～8 d;在一个生长周期内,培养液的pH先降后升,最后逐渐趋于稳定,而电导率则持续下降;三次继代后,将悬浮培养物接种到固体分化培养基上分化可得到成熟体细胞胚状体,将其接种到植株再生培养基上,45 d后可成功获得再生植株.橡胶树花药体胚胚性愈伤组织悬浮系的建立,为橡胶树胚性愈伤组织的快速增殖及体细胞胚的规模化繁育提供帮助.
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