【摘 要】
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目的探讨肾缺血再灌注中肾组织的自噬水平及补体C5a/C5aR通路对小鼠肾组织自噬的影响。方法选择雄性BALB/C小鼠和C5a受体(C5aR)基因敲除(BALB/C背景)小鼠，通过微动脉夹夹闭小鼠双侧肾蒂的方法建立小鼠肾脏缺血再灌注损伤动物模型，设野生型BALB/C(Wild Type, WT)对照小鼠组和C5aR基因敲除(Knock Out, KO)小鼠组。HE染色观察比较两组小鼠肾脏病变；测定再
【机 构】
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目的探讨肾缺血再灌注中肾组织的自噬水平及补体C5a/C5aR通路对小鼠肾组织自噬的影响。
方法选择雄性BALB/C小鼠和C5a受体(C5aR)基因敲除(BALB/C背景)小鼠，通过微动脉夹夹闭小鼠双侧肾蒂的方法建立小鼠肾脏缺血再灌注损伤动物模型，设野生型BALB/C(Wild Type, WT)对照小鼠组和C5aR基因敲除(Knock Out, KO)小鼠组。HE染色观察比较两组小鼠肾脏病变；测定再灌注24 h后肾功能(血清尿素氮值)和肾损伤分子-1(KIM-1)的mRNA水平；免疫荧光和western-blot检测自噬相关蛋白(LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ、P62)的表达情况。体外培养人肾小管上皮细胞系 (Human kidney tubular epithelial cells line，HK2)细胞，加入重组人C5a或C5a联合C5aR阻断剂(C5aR Antagonist，C5aRA)刺激培养24 h，免疫荧光和western-blot检测细胞LC3的水平。
结果与野生型对照小鼠组相比，C5aR基因敲除小鼠肾损伤程度显著减轻；缺血再灌注后，野生型小鼠肾组织自噬相关蛋白LC3的表达随时间逐渐升高；C5aR基因敲除可使缺血再灌注引发的自噬水平明显降低(P<0.05)；体外实验中，加入重组人C5a后，HK2细胞中自噬相关蛋白LC3Ⅱ的表达随C5a刺激浓度升高而逐渐增加；加入C5aRA后，自噬水平显著下调(P<0.05)。
结论补体C5a/C5aR通路可促进肾缺血再灌注引发的自噬。
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