黄瓜膨胀素的重组表达及活性分析

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目的:提高纤维素的酶水解效率和开发高效的纤维素酶水解过程。方法:采用RT-PCR方法从黄瓜胚轴细胞中分离了膨胀素SI的cDNA,并使之与毕赤酵母表达质粒pPICZ(A连接,形成重组质粒pPICZ(A-exsl。通过电转化方法,用质粒pPICZ(A-exsl转化巴氏毕赤酵母GS115,得到重组菌株P.pastoris-exsl。在该重组菌株中,膨胀素的基因通过同源重组整合在毕赤酵母的染色体上,并处于毕赤酵母甲醇氧化酶启动子的下游。重组菌株P.pastoris-exsl在甲醇诱导下可合成并分泌膨胀素。结果:培
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