【摘 要】
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为了探讨组合添加雌激素和催乳素对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）酪蛋白合成的影响及作用机制,以课题组前期筛选出的最佳雌激素和催乳素浓度为基础,开展组合添加试验。雌激素和催乳素的添加总量为300 ng/mL,根据二者的添加比例分为试验Ⅰ组（对照组,不添加雌激素和催乳素）、试验Ⅱ组（雌激素?催乳素=5?1）、试验Ⅲ组（雌激素?催乳素=2?1）和试验Ⅳ组（雌激素?催乳素=1?2）。采用MTT法检测细胞增殖
【基金项目】
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国家自然科学基金（批准号:31860652）资助的课题～～；
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为了探讨组合添加雌激素和催乳素对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）酪蛋白合成的影响及作用机制,以课题组前期筛选出的最佳雌激素和催乳素浓度为基础,开展组合添加试验。雌激素和催乳素的添加总量为300 ng/mL,根据二者的添加比例分为试验Ⅰ组（对照组,不添加雌激素和催乳素）、试验Ⅱ组（雌激素?催乳素=5?1）、试验Ⅲ组（雌激素?催乳素=2?1）和试验Ⅳ组（雌激素?催乳素=1?2）。采用MTT法检测细胞增殖情况;qRT-PCR法检测酪蛋白合成、mTOR信号通路和JAK2-STAT5信号通路相关基因表达情况;蛋白印迹法检测细胞中α酪蛋白和β酪蛋白水平。结果显示,与对照组相比,试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组均显著增加了BMECs的增殖率,提高了BMECs中CSN1S1、CSN3、AMPK、PI3K、AKT、mTOR、eIF4E、JAK2、STAT5、ERβ和PRLR的基因表达水平（P＜0.05）;试验Ⅲ组和试验Ⅳ组显著提高了BMECs中CSN2的基因表达水平（P＜0.05）。与对照组相比,试验Ⅱ组和Ⅳ组显著增加了BMECs的α酪蛋白和β酪蛋白表达量（P＜0.05）,其中α酪蛋白的表达量分别提高了22.7%和38.6%,β酪蛋白的表达量分别提高了62.9%和102.9%。试验Ⅲ组β酪蛋白的表达量显著高于对照组（P＜0.05）,而α酪蛋白表达量与对照组无显著差异。综合细胞增殖和酪蛋白表达的结果,组合添加100 ng/mL雌激素和200 ng/mL催乳素的试验Ⅳ组对BMECs酪蛋白合成的促进效果最佳。
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