目的建立高效液相色谱(HPLC)法同时检测蝉花培养物4种核苷类成分,分析不同斜面培养基及固体培养基对4种核苷类成分的影响。方法建立4种核酸类成分——尿苷、鸟苷、腺苷、N6-(2-羟乙基)腺苷的HPLC检测方法,应用Waters Symmetry shield TMRP C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为水-甲醇,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温30℃;进样量10μL;检测波长260 nm;外标法测定4种核苷类成分水平。对包括假单胞菌选择培养基(PSA)、沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDAY,1 000 m L中含葡萄糖量分别为20、30、40 g)在内的斜面培养基和包括江苏农垦(SCM)、烟农24(YN-24)、烟农15(YN-15)、济麦22(JM-22)在内的固体培养基培养的蝉花培养物中4种核酸类成分水平进行测定,利用SPSS16.0统计软件对测定结果进行多重统计分析,验证并找出引起差异的原因。结果建立的HPLC法,4种核苷类成分分离度良好,精密度、稳定性、重复性、加样回收率、耐用性均符合要求;4种不同的斜面培养基对尿苷成分基本无影响(P>0.05),PSA对腺苷、鸟苷、N6-(2-羟乙基)腺苷的水平有明显促进作用(P<0.05);固体培养基SCM的4种核苷类成分的水平较高。结论培养基种类对蝉花培养物核苷类成分变化有直接的影响,确定蝉花虫草的生产工艺时,应充分考虑培养基的选择,同时结合产品成分和生产成本等因素进行综合评价。