人Foxp3基因真核载体的构建及在CD4+CD25-T细胞中的表达和功能

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目的:构建人Foxp3基因的真核表达载体并转染人CD4+CD25-T细胞,观察其在CD4+CD25-T细胞中的表达及功能。方法:构建人Foxp3基因pEGFP-N1真核表达载体,经酶切及双向测序鉴定基因序列的正确性。通过电穿孔法将重组载体转入人CD4+CD25-T细胞中,利用荧光显微镜及流式细胞术检测转染效率.采用3H.TdR掺入法检测转染细胞对单个核细胞增殖能力的影响。结果:酶切及测序鉴定pEGFP-N1.Foxp3重组质粒基因序列完全正确,转染的CD4*CD25-T细胞Foxp3阳性表达率为23.7%
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