【摘 要】
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目的 探讨铅暴露对星形胶质细胞(AS)中GLAST和GLT-1蛋白表达及转运体功能的影响.方法 取出生1～3 dWistar大鼠的仔鼠星形胶质细胞进行原代培养,以胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色鉴
【机 构】
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中国医科大学基础医学院生理学教研室,辽宁沈阳110001;中国医科大学基础医学院染色质生物学研究室细胞生物学卫生部重点实验室;中国医科大学公共卫生学院劳动卫生学教研室;中国医科大学药学院临床药理学教研
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目的 探讨铅暴露对星形胶质细胞(AS)中GLAST和GLT-1蛋白表达及转运体功能的影响.方法 取出生1～3 dWistar大鼠的仔鼠星形胶质细胞进行原代培养,以胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色鉴定细胞纯度后,进行0(对照组)、50、100、200及400μmol/L乙酸铅染毒,染毒时间为72 h.倒置显微镜下观察细胞形态并采集图像;以AlamarBlue法检测细胞活力;以Western blot法检测GLAST和GLT-1蛋白的表达;以同位素标记法测定谷氨酸转运体功能.结果 50和100μmol/L铅暴露组的细胞形态与对照组相比,未见明显改变;200 μmol/L铅暴露72 h后,少量细胞开始脱壁,细胞间隙增大;400 μmol/L铅暴露组细胞变大,突起变短或消失,脱壁细胞数量明显增多.与对照组相比,各浓度铅暴露组的AS活力均降低(P＜0.05),100、200和400 μmol/L铅暴露组的GLT-1蛋白含量下降(P＜0.05),但各浓度铅暴露组的GLAST蛋白含量无显著改变.100、200和400 μmol/L铅暴露组的3H-Glu放射性低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 铅暴露可明显抑制AS中GLT-1蛋白的表达,并导致AS的Glu转运体功能下降.
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