脉冲电场对肝癌细胞的凋亡诱导效应及线粒体跨膜电位的影响研究

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为研究脉冲电场对肿瘤细胞的杀伤作用,采用Annexin V-FITC凋亡试剂盒和流式细胞技术检测电脉冲(1kV/cm、100μs和1 Hz)作用后人肝癌细胞HepG2和人肝细胞L02在不同作用时间点(8、15、30和60 s)下的凋亡效应。实验结果表明:与对照组相比,8 s刺激时间不足以诱导HepG2细胞凋亡,而15、30和60 s的刺激时间与可以明显的诱导HepG2凋亡,并且凋亡率随刺激时间增加而增大,说明延长刺激时间可以增大肿瘤细胞的凋亡程度;另外,在刺激60 s时,肿瘤细胞凋亡率是正常细胞的2倍,这表明肿瘤细胞比正常细胞对电脉冲的刺激更敏感。采用罗丹明123探针染色,用激光共聚焦显微镜实时观测细胞的线粒体膜电位荧光强度变化,观察到电刺激30 s前细胞线粒体膜电位无明显变化,而30 s后开始出现膜电位陡升后急剧降低的变化现象,揭示线粒体途径可能是脉冲诱导肿瘤细胞凋亡的机理之一。
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