【摘 要】
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目的 对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)受脂多糖 (LPS)刺激后上调基因表达谱进行筛选及分析。方法 以受LPS刺激HUVCE为实验方 ,未刺激HUVEC为驱使方 ,进行抑制消减杂交 (SSH
【机 构】
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第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金资助重点项目 ( 39830 4 0 0 )
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目的 对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)受脂多糖 (LPS)刺激后上调基因表达谱进行筛选及分析。方法 以受LPS刺激HUVCE为实验方 ,未刺激HUVEC为驱使方 ,进行抑制消减杂交 (SSH)建立消减cDNA文库 ,经菌落原位斑点杂交筛选文库后将阳性克隆测序和同源性分析 ,并用RT PCR验证新的cDNA序列。结果 共获得 2 5条上调表达的基因 ,分别与炎症反应、细胞骨架重构、细胞生长和凋亡、胞内信号转导相关 ,并克隆到 3条新基因表达序列标签 (EST) ,RT PCR验证了这些新EST序列只在LPS刺激的内皮细胞中表达。结论 抑制消减杂交有效地克隆了人脐静脉内皮细胞LPS刺激后上调表达基因 ,有助于阐明LPS直接激活血管内皮细胞的分子机制
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