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为建立东北林蛙皮肤抗菌肽反相高效液相纯化体系，将东北林蛙（Rana dybowskii）皮肤分泌物冻干粉用0．1％TFA水溶液溶解，并对分析样品进行全波长扫描，确定检测波长，通过SunfireTM C18（5μm，4．5mm×150mm）色谱分析柱对分离条件进行了优化。结果表明：分泌物在216nm和280nm处均有明显的吸收峰；乙腈能使样品较早被洗脱，而甲醇则能延迟样品的洗脱；流速与样品保留时间、分离度成反相关。经试验证实，最佳液相色谱检测条件为：检测波长216nm和280nm；流动相为V（乙腈