检测肾移植受者术后血浆外泌体miR-21、miR-210和miR-4639表达变化，分析外泌体miR-21、miR-210和miR-4639单独及联合对肾移植术后并发慢性移植肾肾病(CAN)的诊断价值。
方法回顾性分析2018年1月至2019年1月苏州大学附属第三医院泌尿外科实施的同种异体肾移植受者临床资料，最终纳入34例受者，根据肾移植术后是否发生CAN将其分为CAN组及对照组。采用凝胶排阻色谱法提取血浆外泌体，采用Nanosight NS300分析外泌体粒径，采用蛋白质印迹法(WB)分析外泌体表面标志物(CD63和Alix)表达情况。采用卡方检验比较CAN组和对照组受者性别比例。采用成组t检验比较两组受者移植前年龄、末次血清肌酐、血清尿素氮和估算肾小球滤过率(eGFR)。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血浆外泌体miR-210、miR-21和miR-4639对肾移植术后并发CAN的诊断效能。P<0.05为差异有统计学意义。
结果CAN组(n＝18例)和对照组(n＝16例)受者性别以及移植前年龄、末次血清肌酐、血清尿素氮和eGFR差异均无统计学意义(χ2＝0.04、t＝0.86、-1.84、-1.83和0.85，P均>0.05)。透射电镜、Nanosight NS300及WB检测结果均提示提取样本为血浆外泌体。CAN组与对照组血浆外泌体miR-210、miR-21和miR-4639相对表达量差异均有统计学意义(t＝4.13、3.38和2.33，P均<0.05)。miR-210预测肾移植术后并发CAN的ROC曲线下面积为0.854(95%CI：0.730～0.979，P<0.05)，当截断值＝1.320时，敏感度为66.7%，特异度为93.8%。miR-21预测肾移植术后并发CAN的ROC曲线下面积为0.774(95%CI：0.618～0.931，P<0.05)，当截断值＝1.243时，敏感度为55.6%，特异度为93.8%。miR-4639预测肾移植术后并发CAN的ROC曲线下面积为0.670(95%CI：0.482～0.859，P<0.05)，当截断值＝0.936，敏感度为66.7%，特异度为75.0%。随后，构建基于miR-210、miR-21和miR-4639 3个指标的联合诊断模型，回归方程z＝5.293×[miR-210]＋5.046×[miR-21]＋0.433×[miR-4639]-13.373，联合预测概率值p＝ez/(1＋ez)。miR-210、miR-21和miR-4639联合预测肾移植术后并发CAN的ROC曲线下面积为0.938(95%CI：0.860～1.015，P<0.05)，当截断值＝0.587，敏感度为83.33%，特异度为93.75%。当联合预测值为0.587时，CAN组有83.3%(15/18)的个体被联合预测模型诊断出阳性结果，而对照组有93.8%(15/16)的个体被联合预测模型诊断出阴性结果，表明该联合预测模型有较好的诊断价值。
结论miR-210、miR-21和miR-4639组成的miRNA阵列可能可以用于早期诊断肾移植术后并发CAN。