VEGFR-2／KDR三区的载体构建、表达及胃癌患者抗-KDR抗体的检测

来源 :检验医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wangxiang62

【摘要】

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目的扩增人血管内皮细胞生长因子受体-2／激酶插入受体（VEGFR-2／KDR）三区基因，构建表达载体，在大肠埃希菌中表达，获得纯化蛋白。检测胃癌术前患者外周血中抗-KDR抗体水平，为进一步研究

【作者】

：

陈小波黄锡全张隆谢爽孙健康向东

【机构】

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上海中医药大学附属普陀医院,江苏大学医学技术学院

【出处】

：

检验医学

【发表日期】

：

2007年2期

【关键词】

：

血管内皮细胞生长因子受体-2 克隆表达胃癌抗-KDR抗体 VEGFR-2/KDR Cloning Expression Gastric cancer An

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目的扩增人血管内皮细胞生长因子受体-2／激酶插入受体（VEGFR-2／KDR）三区基因，构建表达载体，在大肠埃希菌中表达，获得纯化蛋白。检测胃癌术前患者外周血中抗-KDR抗体水平，为进一步研究KDR与抗-KDR抗体在胃癌中的作用奠定基础。方法从人血管内皮细胞株ECV304提取总RNA，逆转录后，聚合酶链反应（PCR）扩增KDR胞外段三区基因，连接到pMD18-T载体测序；酶切后将目的基因插入原核表达载体pET28α（＋）构建重组质粒，将重组质粒转化到大肠埃希菌DH5et内并提取质粒，经双酶切鉴定后，再转化

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