四环素诱导的YAP1敲减系统的建立及其对胃癌细胞功能的影响

来源 :西安交通大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：foreststonezgdd

【摘要】

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目的建立一种四环素(tetracycline,DOX)诱导的基因敲减系统,并利用此系统研究YAP1对胃癌细胞功能的影响。方法构建pLKO.1-tetON-YAP1敲减的慢病毒载体,酶切和测序方法检测载

【作者】

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王贺刘俊黄硕丁晓琛乔一桓姜勋亮闫静川李纪鹏

【机构】

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空军军医大学西京医院消化病院消化外科,空军军医大学基础医学院,空军军医大学生物化学与分子生物学教研室,空军军医大学西京医院实验外科,西安医学院临床医学院

【出处】

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西安交通大学学报:医学版

【发表日期】

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2020年5期

【关键词】

：

四环素诱导表达系统 SHRNA 胃癌 YAP1基因增殖迁移 tetracycline-induced expression systemsmall harp

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目(No.81672751),陕西省重点研发计划(No.2019SF-010)

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目的建立一种四环素(tetracycline,DOX)诱导的基因敲减系统,并利用此系统研究YAP1对胃癌细胞功能的影响。方法构建pLKO.1-tetON-YAP1敲减的慢病毒载体,酶切和测序方法检测载体构建成功与否;慢病毒感染胃癌细胞系SGC-7901和MKN-28,建立DOX诱导的YAP1敲减的胃癌细胞系;RT-PCR检测YAP1 mRNA相对表达量,Western blotting检测YAP1蛋白水平变化;平板克隆实验检测细胞增殖情况;划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移的情况。结果构建四环素

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