【摘 要】
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参考大豆疫霉的CRISPR/Cas9基因组编辑技术体系,针对荔枝霜疫霉RXLR效应蛋白编码基因PlAvh133设计了20 bp的sgRNA靶向序列,结合同源替换的方式对该基因进行敲除.利用聚乙二醇
【机 构】
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华南农业大学植物保护学院/广东省微生物信号与作物病害防控重点实验室,广州510642;广东省农业科学院水稻研究所,广州510642;岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心,茂名525000
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参考大豆疫霉的CRISPR/Cas9基因组编辑技术体系,针对荔枝霜疫霉RXLR效应蛋白编码基因PlAvh133设计了20 bp的sgRNA靶向序列,结合同源替换的方式对该基因进行敲除.利用聚乙二醇(PEG)介导的原生质体转化,共获得了58个具有G418抗性的转化子,通过PCR和测序分析证明其中5个转化子的PlAvh133基因被敲除,敲除效率约为8.6％.荧光定量PCR分析证实P1Avh133敲除突变体中该基因不表达.本研究结果为荔枝霜疫霉的基因功能研究提供了重要的技术基础.
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