硝化应激对小鼠肝原代细胞损伤及机制研究

来源 :医学美学美容(中旬刊) | 被引量 : 0次 | 上传用户:liyang12886
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目的:观察硝化应激重要硝化剂过氧亚硝基阴离子(ONOO-)对肝原代细胞的体外损伤作用及机制研究。方法:通过不同浓度ONOO-供体SIN-1作用于肝原代细胞24h ,探索SIN-1的有效作用剂量,同时加入ONOO-清除剂FeTMPyP 处理确认是否是 ONOO-对肝原代细胞产生影响。将肝原代细胞分为Control 组,SIN-1作用组和ONOO-清除剂组,用MTT 法分别检测各组肝细胞存活率,LDH 检测细胞坏死情况,Western Blot 法检测细胞内ONOO-生成印记蛋白---3-硝基酪氨酸(3-NT 或NT )表达情况。结果:200μM 的SIN-1刺激24h 使肝细胞存活率明显下降,同时检测该浓度下的肝细胞培养基中LDH 的活性发现也明显升高。WB 结果显示 SIN-1组细胞NT 蛋白表达明显升高。结论:ONOO-能够介导肝细胞硝化应激,造成原代肝细胞的损伤。
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