【摘 要】
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采用SMART技术在酵母菌株AH109中构建了干旱胁迫下水稻根部全长cDNA文库,采用改进的滤膜杂交方法建立了高效酵母杂交体系,以抗旱相关水稻转录调控因子OsWRKy71基因作为诱饵对
【机 构】
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云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所,内华达大学拉斯维加斯校区生命科学院
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采用SMART技术在酵母菌株AH109中构建了干旱胁迫下水稻根部全长cDNA文库,采用改进的滤膜杂交方法建立了高效酵母杂交体系,以抗旱相关水稻转录调控因子OsWRKy71基因作为诱饵对该方法进行检验.实验获得的酵母杂交文库容量为4.9×10 6,平均插入片段为800 bp,达到了基因分离和克隆等后续研究的标准.同时采用滤膜杂交法将文库的杂交效率提高到了6.9％,是液体杂交法的6倍以上.该方法不需要特殊的设备,且具有低消耗和高效率的特点,可用于高通量酵母双杂交分析.
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