【摘 要】
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目的 建立疫苗原辅料中猪圆环病毒1型（porcine circovirus type 1, PCV1）、2型（porcine circovirus type 2, PCV2）和猪细小病毒（porcine parvovirus, PPV）的聚合酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）检测方法并进行验证。方法 根据NCBI公布的PCV1、PCV2和PPV基因序列设计了
【基金项目】
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国家重点研发计划项目（2020YFC0841800）；
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目的 建立疫苗原辅料中猪圆环病毒1型（porcine circovirus type 1, PCV1）、2型（porcine circovirus type 2, PCV2）和猪细小病毒（porcine parvovirus, PPV）的聚合酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）检测方法并进行验证。方法 根据NCBI公布的PCV1、PCV2和PPV基因序列设计了3对特异性引物，通过优化反应条件，建立起检测疫苗原辅料中PCV1、PCV2和PPV的PCR检测方法，并对方法的重复性、中间精密度、专属性、耐用性和检测限进行了验证。结果 PCR反应的退火温度为55℃,特异性引物浓度为10μmol/L。该方法重复性、中间精密度、专属性和耐用性均良好，对PCV1、PCV2、PPV的最低检测限分别为1 pg/μL、100 fg/μL和10 fg/μL。结论 PCR检测方法可以有效检测出疫苗原辅料中外源病毒污染情况，能为生产合格的疫苗提供质量保证。
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