一种新的人Beclin1转录本的克隆、原核表达和纯化

来源 :新乡医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chaohushixi
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目的克隆新的人Beclin1转录本DEL-E8-E10并对其所编码的蛋白质进行表达和纯化。方法以SiHa细胞的cDNA作为模板进行聚合酶链式反应(PCR)扩增DEL-E8-E10基因,构建原核表达载体pET32a-DEL-E8-E10。在大肠杆菌中诱导表达His-DEL-E8-E10融合蛋白,利用镍柱亲和层析纯化His-DEL-E8-E10融合蛋白。结果克隆到DEL-E8-E10基因,成功构建原核表达载体pET32a-DEL-E8-E10,并获得可溶性表达。利用镍柱亲和层析纯化HisDEL-E8-E10融
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