唑来膦酸对兔成骨细胞分化及骨保护素分泌的影响

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目的 探讨不同浓度的唑来膦酸对成骨细胞分化的影响及其对骨保护素(osteoprotegerin,OPG)分泌的促进作用,以期为唑来膦酸的进一步局部应用提供理论依据.方法 利用组织块培养法进行成骨细胞原代及传代培养.原代培养3d后对细胞爬片行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色,原代培养18 d后将细胞爬片用钙结节染色并鉴定;将唑来膦酸加入含传代第3代成骨细胞悬液的培养液中使其终浓度为0(对照组)、10-5、10-6、10-7、10-8及10-9 mol/L(5个实验组),收集细胞上清液进行ALP检测,用放射免疫测定法测定骨钙素的含量;培养3 d后收集细胞,结合蛋白质印迹法测定细胞分泌的OPG.结果 成骨细胞ALP染色阳性,钙结节茜素红染色呈橘红色钙化结节,唑来膦酸浓度为10-6、10-7、10-8及10-9 mol/L的实验组可促进骨钙素含量增加[分别为(2.80±0.51)、(3.20±0.33)、(4.70±0.35)、(3.40±0.36)μg/L]、ALP活性增强[分别为(5.91±0.35)、(7.62±0.33)、(10.00±0.38)、(8.91±0.29)U/L]、OPG表达升高[分别为(526 955.7±64 068.9)、(661 447.9±75 223.4)、(753 083.3±70 300.0)、(655 184.1±63 401.1)],与对照组[骨钙素含量为(2.40±0.35)μg/L、ALP活性为(4.28±0.36)U/L、OPG表达为(64 713.7±28 715.6)]相比差异均有统计学意义(P<0.01),并在10-8mol/L组达峰值.结论 唑来膦酸可以提高成骨细胞活性,促进OPG分泌.
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