【摘 要】
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目的 构建人转化生长因子βⅡ型受体细胞外区基因的真核表达载体,初步探讨可溶性转化生长因子βⅡ型受体(sTGFβRⅡ)对结直肠癌LoVo细胞侵袭能力的影响.方法 采用DNA重组技术
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目的 构建人转化生长因子βⅡ型受体细胞外区基因的真核表达载体,初步探讨可溶性转化生长因子βⅡ型受体(sTGFβRⅡ)对结直肠癌LoVo细胞侵袭能力的影响.方法 采用DNA重组技术构建sTGFpRⅡ的表达载体pcDNA3.1(+)/sTGFβRⅡ,用脂质体转染技术转染人结直肠癌LoVo细胞,以RT-PCR、Western印迹和细胞免疫荧光技术分别检测目的基因及蛋白表达;MatrigelTM侵袭试剂盒检测sTGFβRⅡ对LoVo细胞侵袭能力和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)血管生成能力的影响,RT-PCR检测sTGFβRⅡ对LoVo细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因和血管内皮生长因子(VEGF)基因表达的影响.结果 sTGFβRⅡ在LoVo细胞中获得表达,转染sTGFβRⅡ基因的LoVo细胞侵袭能力(穿膜细胞数为111.0±10.1)明显低于空载体转染组(171.3±3.2)和对照组(177.0±2.7,F=100.1,P＜0.01),HUVEC在人工膜上形成管腔的能力显著下降,转染组管腔数目(1.3±0.6)低于空载体转染组(4.7±1.5)和对照组(5.0±1.0,F=13.3,P＜0.01).pcDNA3.1(+)/sTGFβRⅡ转染的LoVo细胞MMP-9和VEGF基因表达明显下降(P＜0.01).结论 sTGFβRⅡ能拮抗TGFβl的生物活性,可能通过抑制MMP-9和VEGF表达,进而抑制LoVo细胞侵袭和诱导血管生成能力,达到抗肿瘤作用.
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