【摘 要】
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目的 探讨MAP4K1在黑色素瘤(cutaneous melanoma,CM)细胞和组织中表达及对恶性CM细胞A375迁移、侵袭的影响和机制.方法 收集自2010年1月至2015年12月重庆市中医院皮肤科诊治
【机 构】
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重庆市中医院 皮肤科,重庆 400011;重庆大学附属肿瘤医院 肿瘤转移与个体化诊治转化研究重庆市重点实验室,重庆 400030
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目的 探讨MAP4K1在黑色素瘤(cutaneous melanoma,CM)细胞和组织中表达及对恶性CM细胞A375迁移、侵袭的影响和机制.方法 收集自2010年1月至2015年12月重庆市中医院皮肤科诊治的CM患者54例,采用GEPIA在线分析CM组织中MAP4K1的表达,实时定量聚合酶链法和免疫组织化学法检测CM组织中MAP4K1 mRNA和蛋白的表达水平;以MAP4K1基因表达最高的A375细胞为研究对象,采用脂质体转染法将MAP4K1抑制质粒和对照质粒转染至A375细胞;免疫蛋白印迹实验和实时定量聚合酶链法分别检测MAP4K1的基因敲除;分别通过Transwell实验检测MAP4K1敲除后对细胞侵袭的影响;荧光素酶报告实验检测MAP4K1对YAP/TAZ的调控;GEPIA验证MAP4K1与Hippo-YAP通路下游靶点的表达相关性;免疫蛋白印迹实验验证MAP4K1敲除后对Hippo-YAP信号通路的影响.结果 与癌旁组织相比,MAP4K1 mRNA和蛋白在皮肤恶性CM细胞和组织中的表达上调(P<0.001);MAP4K1基因敲除A375细胞迁移和侵袭的能力明显受到抑制(P<0.001);MAP4K1敲除后YAP/TAZ的转录活性及下游的靶分子下调;MAP4K1基因敲除能抑制Hippo-YAP通路传导.结论 MAP4K1在CM中表达上调,可能作为潜在的癌基因调控Hippo-YAP通路促进CM的发生发展.
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