【摘 要】
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目的 探讨hsa＿circ＿0000734对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞MH7A增殖、凋亡和迁移的调控作用及潜在机制。方法 体外培养MH7A细胞，使用hsa＿circ＿0000734过表达质粒转染MH7A细胞，实验分为空白对照组（Mock组）、转染对照组（NC组）和转染组（hsa＿circ＿0000734组）,采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测各组细胞中hsa＿circ＿0000734的表
【机 构】
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湖北文理学院附属襄阳市中心医院北区皮肤科
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目的 探讨hsa＿circ＿0000734对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞MH7A增殖、凋亡和迁移的调控作用及潜在机制。方法 体外培养MH7A细胞，使用hsa＿circ＿0000734过表达质粒转染MH7A细胞，实验分为空白对照组（Mock组）、转染对照组（NC组）和转染组（hsa＿circ＿0000734组）,采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测各组细胞中hsa＿circ＿0000734的表达情况，细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测细胞增殖活力，Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率，Transwell实验检测细胞迁移能力，蛋白免疫印迹（Western blot）法分析增殖细胞核抗原（PCNA）、活化的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved Caspase-3）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达。双荧光素酶报告基因实验分析hsa＿circ＿0000734和miR-16-5p之间的靶向关系。通过转染过表达miR-16-5p,采用同样的方法分析细胞增殖、凋亡和迁移能力的变化。结果 与Mock组和NC组比较，hsa＿circ＿0000734组细胞中hsa＿circ＿0000734和Cleaved Caspase-3的表达及细胞凋亡率均明显升高（P＜0.05）,而miR-16-5p、PCNA、MMP-2和MMP-9的表达、细胞增殖活力和迁移能力均明显降低（P＜0.05）;Mock组和NC组比较，各指标差异无统计学意义（P＞0.05）。双荧光素酶报告基因实验证实了hsa＿circ＿0000734和miR-16-5p存在靶向关系。过表达miR-16-5p能够逆转过表达hsa＿circ＿0000734对MH7A细胞生长和迁移的抑制作用。结论 hsa＿circ＿0000734可通过靶向调控miR-16-5p的表达抑制MH7A细胞的生长和迁移。
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