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目的
初步探讨核糖体蛋白S7(RPS7)对宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响。
方法用构建的带增强绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的RPS7重组表达质粒pIRES2-EGFP-RPS7转染HeLa细胞作为实验组,以转染空载体pIRES2-EGFP的细胞作为对照组,流式细胞仪检测带绿色荧光细胞的含量,Western blotting检测细胞中RPS7蛋白表达;用带有荧光染料藻蓝蛋白(APC)的磷脂结合蛋白-V(Annexin-V)试剂对瞬时过表达和稳定干扰RPS7的细胞进行染色,流式细胞仪分析细胞凋亡水平。
结果在获得的瞬时过表达RPS7的HeLa细胞中,细胞凋亡水平明显高于转染空载体的细胞[(10.00±0.60) %∶(5.73±0.61)%],差异有统计学意义(t=8.63, P=0.001)。另一方面,抑制RPS7表达的Sh-RPS7细胞凋亡水平低于对照细胞[(3.08±0.49)%∶(5.97±0.63)%],差异有统计学意义(t=6.40, P=0.003)。
结论上调RPS7表达具有促进HeLa细胞凋亡的作用,而下调RPS7表达可抑制HeLa细胞的凋亡。