【摘 要】
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为建立一种快速、准确检测猪丹毒杆菌TaqMan荧光定量PCR方法,本研究根据猪丹毒杆菌16SrRNA基因保守序列设计种特异性引物及探针,并优化反应条件,建立了检测猪丹毒杆菌的TaqMa
【机 构】
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云南省畜牧兽医科学院,云南昆明650224
【出 处】
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云南省畜牧兽医学会2017年学术年会
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为建立一种快速、准确检测猪丹毒杆菌TaqMan荧光定量PCR方法,本研究根据猪丹毒杆菌16SrRNA基因保守序列设计种特异性引物及探针,并优化反应条件,建立了检测猪丹毒杆菌的TaqMan荧光定量PCR检测方法.结果表明:以重组质粒为标准品建立的标准曲线在7.66×108拷贝/μL～7.66×101拷贝/μL范围内具有良好的线性关系;最低可以检测到7.66×101拷贝/μL的标准品阳性质粒;该方法与其他22种常见细菌均无交叉反应;批内和批间变异系数均小于3％.应用建立的方法和细菌分离鉴定方法分别对36份临床样品进行检测,阳性率分别为19.44％和11.11％,两者符合率为91.67％.本研究结果表明,所建立的方法可用于猪丹毒杆菌感染的早期诊断、临床样品的高通量快速诊断检测以及猪丹毒杆菌定量分析.
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