大鼠源卡氏肺孢子菌p55抗原基因克隆和序列分析

来源 :中国人兽共患病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fiona_01
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目的克隆大鼠源卡氏肺孢子菌55kDa抗原(p55)基因。方法取肺孢子菌病大鼠肺组织制备肺孢子菌DNA,并以此模板扩增p55基因,将PCR产物与pGEM—T载体连接.转化E.coli DH5a.在含氨苄青霉素(Amp)的LB培养基上筛选出重组子,提取质粒进行PCR扩增、酶切鉴定、序列测定及序列比较分析。结果p55基因体外扩增产物长度为l286bp,重组质粒经PCR及酶切鉴定结果表明获得正确重组子,测序结果与文献报道同源性为99.8%。结论成功扩增了p55基因,并插入克隆载体pGEM—T中。p55基因的克隆为
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