【摘 要】
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探讨隐丹参酮对大鼠心肌细胞氧糖剥夺/复氧糖损伤模型的保护作用及其抑制JNK/p38 MAPK信号通路的机制研究.方法 取成年SD大鼠心肌细胞培养, 构建氧糖剥夺/复氧糖损伤模型, 利
【机 构】
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上海健康医学院附属周浦医院心内科 上海市, 201318
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探讨隐丹参酮对大鼠心肌细胞氧糖剥夺/复氧糖损伤模型的保护作用及其抑制JNK/p38 MAPK信号通路的机制研究.方法 取成年SD大鼠心肌细胞培养, 构建氧糖剥夺/复氧糖损伤模型, 利用MTT法检测不同氧糖剥夺时间和复氧糖时间细胞活力, 筛选隐丹参酮预处理最佳作用剂量. ELISA分析隐丹参酮预处理对氧糖剥夺/复氧糖损伤细胞乳酸脱氢酶 ( LDH) 表达的影响; 流式细胞术进行细胞凋亡分析; Western印迹技术检测各组细胞内 JNK、 p-JNK、 p38/p-p38、 Bcl-2、 Bax、 cleaved-caspase-9、 cleaved-caspase-3蛋白质水平, 分析隐丹参酮对JNK/p38 MAPK信号通路的影响.结果 MTT结果显示: 大鼠心肌细胞氧糖剥夺 ( OGD) 2 h后, 开始复氧糖 ( R) 处理, 与R0 相比, R3h时细胞的活力开始下降 ( P<0.05), 且R24 h后细胞活力下降更为显著 (P0.05), 与OGD 2 h/R24 h (模型组) 相比, 浓度为5 μmol/L的隐丹参酮预处理能够显著修复氧糖剥夺/复氧糖对大鼠心肌细胞的损伤, LDH表达水平显著降低 ( P<0.05); 流式细胞术分析发现, 与模型组相比, 5 μmol/L的隐丹参酮预处理后细胞凋亡水平明显降低 ( P<0.05). Western印迹结果显示, 与模型组相比, 预处理组细胞的p-JNK、 p-p38、 Bax、 cleaved-caspase-9、 cleaved-caspase-3 表达量明显偏低 (P<0.05), 而Bcl-2蛋白质水平有所增加 ( P<0.05).结论 隐丹参酮能够通过抑制JNK/p38 MAPK信号通路, 修复氧糖剥夺/复氧糖对损伤, 保护大鼠心肌细胞.
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