原核表达纯化新疆出血热病毒(XHFV) YL04057株的多表位肽，以其为抗原建立检测动物血清抗XHFV抗体的间接ELISA方法。

依照对XHFV YL04057株核蛋白和糖蛋白氨基酸序列的亲水性和抗原决定簇位点分析，设计包含有保守性强的共6个优势B细胞表位的多表位基因片段，经串联重复成为双拷贝多表位基因MEPX₂，采用化学法合成后构建原核表达质粒pET-32a(＋)-MEPX₂，经诱导表达和镍柱亲和层析纯化获得重组rMEPX₂多表位肽，Western blot检测其抗原性，以其作为包被抗原采用方阵滴定法建立间接ELISA方法检测动物血清，并与商品化试剂盒检测结果进行比较。

经双酶切鉴定和测序证实构建的重组表达质粒pET-32a(＋)-MEPX₂正确，经SDS-PAGE分析和Western blot鉴定证实rMEPX₂表达正确，相对分子质量约为49×10³，能被His-tag单抗及天然感染XHFV的羊血清特异性识别。以纯化的rMEPX₂为抗原建立了检测XHFV IgG抗体的间接ELISA方法，用此法对108份绵羊血清样品进行检测，并与双抗原夹心法商品化试剂盒检测比较，结果显示基于rMEPX₂建立的检测方法具有较高的特异性。

成功获得抗原性强的重组多表位肽rMEPX₂，以其为抗原建立的间接ELISA方法可用于XHFV特异性抗体的检测。