【摘 要】目的：对RF-LAMP技术在鸡肉中小肠结肠炎耶尔森氏菌检测中的应用进行探究。方法：本次研究通过一定样本的肌肉，使用RF-LAMP技术对样本中的小肠结肠炎耶尔森氏菌进行检测，鉴定扩增产物经电泳以及酶切，同时测定灵敏度与人工污染鸡肉的检出限。结果：在本次研究当中，在使用RF-LAMP技术进行检测之后，小肠结肠炎耶尔森氏菌株的检测结果为阳性，对于非小肠结肠炎耶尔森氏菌株的检测来说，结果呈阴性，在使用这种方法进行纯菌的检测当中，灵敏度为61CFU/ml，而对于人工污染鸡肉的检出限为46CFU/g。结论：在目前的检测当中，在对鸡肉中小肠结肠炎耶尔森氏菌进行检测的过程中，通过采用RF-LAMP技术，能够将其自身的优势充分的发挥出来，特别是其自身的灵敏度高、特异性强，能够对小肠结肠炎耶尔森氏菌进行实时检测，实现了检测速度的提升。
　　【关键词】RF-LAMP技术;小肠结肠炎耶尔森氏菌;鸡肉
　　【中图分类号】R378 【文献标识码】B 【文章编号】1002-8714（2019）10-0100-01
　　对于小肠结肠炎耶尔森氏菌来说，是一种革兰氏阴性菌，作为一种食源性病原菌，并不会产生芽孢，同时菌体外没有荚膜，患者的菌体周围会生长周鞭毛[1]。因此，本研究主要是在选取一定鸡肉样本的情况下，对RF-LAMP技术在鸡肉中小肠结肠炎耶尔森氏菌检测中的应用进行探究。
　　1 资料与方法
　　1.1 一般资料
　　本次在进行研究的时候，选取的为某超市当中购买的鸡肉。从培养基与试剂来看，包括营养琼脂、营养肉汤、LB液体培养基以及LB固体培养基;限制性内切酶Taq I、Bst DNA聚合酶、MgCl2以及dNTPs。选用的仪器包括数显超级恒温水浴锅、实时荧光检测仪、DYY-10C型电泳仪、UVIpro凝胶成像系统、QYC-200全温摇床、Whatman T Gradient PCR扩增仪以及TGL-16G离心机。
　　1.2 方法
　　在本次研究当中，纯菌的培养需要选择保藏的小肠结肠炎耶尔森氏菌，将其接种于灭菌的LB液体培养基当中，在28℃的状态下，进行振荡过夜培养[2]。在DNA模板制作的过程中，需要采用热裂解法，进行DNA模板的提取，首先需要在过夜培养的菌悬液，选取其中的1.5ml放置到灭菌离心管当中，进行1min的离心处理，保持11000r/min，然后将上清液清楚;其次，需要使用100μL的灭菌水，对菌体沉淀进行2次洗涤，在加入100μL的灭菌水，进行振荡处理，直到菌体充分的悬浮;最后，需要将菌悬液放入到沸水浴中，煮沸10min，然后取出进行离心处理，离心时间为1min，保持11000r/min，在将上清液转移到另外的灭菌离心管当中之后，在-20℃的状态下保存[3]。
　　1.3 统计学方法
　　在对此次研究当中获取的相关实验数据进行分析的过程中，需要采用统计学的手段，使用的工具为统计学软件SPSS19.0，使用百分率（%）来进行率的表示，进行t检验以及x2检验，在进行统计学显著性衡量的时候，设定的标准为p