反枝苋花粉泛过敏原profilin基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定

来源 :南昌大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:miclleg
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目的克隆表达反枝苋花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白(profilin),并鉴定其免疫学活性。方法利用RT-PCR结合RACE技术克隆反枝苋花粉泛变应原profilin的全长基因,并进行序列分析。设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR获得整个反枝苋花粉profilin的开放阅读框,将其与pET28a载体连接并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,Ni2+亲和层析柱纯化重组蛋白,采用Western-blot检测其IgE结合活性。结果 cDNA核苷酸测序表明反枝苋花粉profilin的全长基因由67
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