酶消化法原代培养兔结膜成纤维细胞及进行传代培养的体会

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目的用酶消化法原代培养兔眼结膜成纤维细胞并进行传代培养.方法取兔眼结膜,加入胰蛋白酶及乙二胺四乙酸二钠直接消化后放入孵箱培养,并通过改进后的传代培养技术将原代培养成功的成纤维细胞进行传代,观察细胞的生长情况.结果原代培养7~9 d成纤维细胞在培养基中长成单层且分布均匀.传代培养后3~4 d成纤维细胞铺满培养基,即可再传代.结论酶消化法原代培养兔眼结膜成纤维细胞比常规的组织块培养法更快促使细胞长成单层,且贴壁细胞分布更均匀.运用改进后的传代培养技术可以使成纤维细胞的增殖和纯化更加方便快捷.
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