【摘 要】
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目的 体外分离、培养树鼩(Tupaia belangeri)胸主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs),并对培养细胞进行初步鉴定,为新型实验动物树鼩的应用研究提供体外模型
【机 构】
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中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心,云南省重大传染病疫苗研发重点实验室,实验树鼩标准化与应用研究省创新团队,昆明650118
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目的 体外分离、培养树鼩(Tupaia belangeri)胸主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs),并对培养细胞进行初步鉴定,为新型实验动物树鼩的应用研究提供体外模型.方法 无菌取幼龄树鼩胸主动脉,采用组织块培养法和胰蛋白酶、胶原酶连续消化法分别进行树鼩胸主动脉血管内皮细胞分离,经完全培养液培养,倒置显微镜观察细胞形态,并用抗Ⅷ因子抗体进行荧光染色鉴定细胞.结果 经组织块培养法分离培养的血管内皮细胞,3d有细胞贴壁,7d后细胞从组织块中大量长出,15 d汇合为单层;酶消化法所得细胞12h即贴壁,3～7d生长较快,12d汇合成单层,镜下观察发现细胞呈典型的铺路石状;两种方法分离所得原代细胞经体外培养传代,6代内,细胞生长均良好;利用血管内皮细胞标志分子Ⅷ因子进行免疫荧光鉴定后确定为阳性.结论 本研究采用简便的方法成功分离到了树鼩胸主动脉血管内皮细胞,为血管内皮细胞相关研究提供了实验模型.
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