成年大鼠心脏祖细胞的体外分离、培养和鉴定

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目的探索从成年大鼠心脏组织中分离、培养心脏祖细胞(CPCs)的有效方法。方法取SD大鼠心脏,经胰蛋白酶和胶原酶Ⅳ消化后,置于组织块培养基中培养,取组织块周围爬出的小、圆、亮的细胞置于心球生长培养基中培养,予以免疫组织化学鉴定。结果 2周左右可见小、圆、亮的细胞附着在组织块周围爬出的成纤维细胞层上,且其c-kit表达阳性。结论经胰蛋白酶和胶原酶Ⅳ消化的方法可以成功地对成年大鼠的CPCs进行分离和体外培养。 Objective To explore an effective method to isolate and culture cardiac progenitor cells (CPCs) from adult rat cardiac tissues. Methods The heart of SD rats was digested with trypsin and collagenase Ⅳ and then cultured in tissue culture medium. Small, round and bright cells crawling out from the tissue mass were placed in the culture medium of heart sphere, Immunohistochemical identification. Results After 2 weeks, small, round, bright cells adhered to the fibroblast layer that had climbed out around the tissue mass, and the c-kit expression was positive. Conclusion The method of trypsin and collagenase Ⅳ can successfully separate and culture CPCs from adult rats.
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